GDF-8 1mg/kunjett Jippromwovi b'mod sinifikanti l-massa tal-muskoli u t-titjib tas-saħħa

GDF-8 1mg/introduzzjoni tal-qalba tal-flixkun

Miostatin|Fattur tat-Tkabbir tat-Trasformazzjoni- Membru tas-Superfamilja 1mg/kunjett

Isem ġeneriku: Myostatin (Fattur tad-Differenzjazzjoni tat-Tkabbir-8)

Isem bl-Ingliż: Myostatin (Fattur tad-Differenzjazzjoni tat-Tkabbir 8, GDF-8)

Struttura tal-proteina: Peptidi maturi huma omodimeri, b'kull katina jkun fiha madwar 110 aċidu amminiku.

Piż molekulari: Madwar 25 kDa (forma ta' monomeru)

Purità: Akbar minn jew ugwali għal 90% (SDS-PAĠNA/HPLC)

Kontenut: 1mg/flixkun

Dehra: Trab lajofilizzat abjad

Ħażna: Iffriża f'-80 grad, ipproteġi mid-dawl, u aħżen f'post niexef.

Gwida għall-Użu u l-Ħażna

GDF-8 (myostatin):

GDF-8, membru tas-superfamilja tal-fattur tat-tkabbir tat-trasformazzjoni-, huwa primarjament espress fil-muskolu skeletriku. Bħala regolatur negattiv tat-tkabbir tal-muskoli, jikkontrolla b'mod preċiż il-massa tal-muskoli skeletriċi billi jorbot mal-passaġġ ta 'sinjalazzjoni tar-riċettur ta' activin IIB/ALK4/5, jinibixxi l-proliferazzjoni u d-divrenzjar tal-mijoblasti. Bħala proteina ta' sinjalazzjoni ta' feedback negattiv ewlieni għat-tkabbir tal-muskoli, għandha rwol ċentrali f'mudelli sperimentali ta' żvilupp tal-muskoli, riġenerazzjoni, atrofija (bħal cachexia tal-kanċer u sarkopenja relatata mal-età-), u mard metaboliku. Meta mqabbla ma 'fatturi pro-anabolism, il-karatteristiċi regolatorji negattivi tiegħu jipprovdu perspettiva unika biex wieħed jifhem il-mekkaniżmi tal-bilanċ tal-omeostasi tal-muskoli.

Minħabba r-rwol regolatorju negattiv kruċjali tiegħu fit-tkabbir tal-muskoli, GDF-8 huwa użat ħafna minn riċerkaturi fil-bijoloġija tal-muskoli, mediċina riġenerattiva, fiżjoloġija tal-eżerċizzju, u mard metaboliku. Meta mqabbla ma 'mudelli knockout tal-ġeni, il-forma ta' proteina rikombinanti tagħha tipprovdi għodda sperimentali standardizzata biex tikkontrolla b'mod preċiż l-intensità ta 'sinjali inibitorji, tistudja doża-reazzjoni u proċessi ta' ħin in vitro u in vivo. L-applikazzjoni tagħha fi studji ta 'disturbi ta' riġenerazzjoni tal-muskoli, mudelli ta 'atrofija tal-muskoli, u riċerka metabolika relatata ma' interazzjonijiet muskoli-xaħam tipprovdi pedament għall-evalwazzjoni ta 'strateġiji ta' intervent potenzjali mmirati lejn il-mogħdija GDF-8.

GDF-8 Applikazzjonijiet:

Bħala regolatur negattiv klassiku tat-tkabbir tal-muskoli, jintuża f'mudelli in vitro u in vivo biex jissimula jew itejjeb b'mod preċiż is-sinjali inibitorji tat-tkabbir tal-muskoli, u b'hekk jistudja l-effetti inibitorji tiegħu fuq il-proliferazzjoni tal-mijoblasti, id-divrenzjar, il-massa tal-muskoli skeletriċi u l-funzjoni. Huwa primarjament użat biex jesplora l-mekkaniżmi molekulari ta 'atrofija tal-muskoli, riġenerazzjoni tal-muskoli indebolita, u l-interazzjonijiet bejn il-muskoli u tessuti oħra (bħal xaħam u għadam).

Huwa użat ħafna f'mudelli ta 'atrofija muskolari, studji tal-funzjoni taċ-ċelluli myoblast/satellite, esperimenti ta' riġenerazzjoni tal-muskoli, u riċerka dwar disturbi metaboliċi tal-muskoli relatati mal-obeżità u d-dijabete. Il-forma ta' proteina rikombinanti standardizzata tagħha tipprovdi għodda ewlenija ta' riċerka għall-evalwazzjoni ta' mediċini ġodda kontra l--atrofija muskolari, l-istudju tal-bażi molekulari tal-adattament tal-eżerċizzju, u l-esplorazzjoni ta' strateġiji terapewtiċi mmirati lejn is-sinjalar GDF-8.

Użu u Metodi ta 'Ħażna

1. Rikostituzzjoni u preparazzjoni:

Solvent rakkomandat:

Solvent preferut: Iddilwa soluzzjoni ta 'aċidu aċetiku b'pH 4.0-5.0 (eż., aċidu aċetiku 20mM).

Trasportatur taċ-ċavetta: Għandha tiżdied il-proteina trasportaturgħas-solvent u d-dilwenti kollha;hija rakkomandata soluzzjoni sterili ta' aċidu aċetiku li jkun fiha 0.1% albumina tas-serum bovin (BSA).

Soluzzjoni tax-xogħol dilwizzjoni: Iddilwa għal pH fiżjoloġiku biPBS sterili jew mezz tal-kultura taċ-ċelluli li jkun fih 0.1-1% BSA.

Assolutament ipprojbit: Huwa strettament ipprojbit li l-proteina tinħall jew iddewweb direttament billi tuża ilma pur, PBS newtrali, jew soluzzjonijiet mingħajr proteini trasportaturi,inkella se jseħħu aggregazzjoni, preċipitazzjoni u inattivazzjoni tal-proteini irriversibbli.

Proċedura ta' preparazzjoni standard:

Preparazzjoni tas-solvent:

Ipprepara soluzzjoni ta 'aċidu aċetiku sterili 20mM li jkun fiha 0.1% BSA (jew proteina trasportatur ta' purità ogħla) u ffiltraha permezz ta 'membrana tal-filtru ta' 0.22μm.

Is-solvent jeħtieġ li jitkessaħ minn qabel-fuq is-silġ qabel l-użu.

Proċedura ta' rikostituzzjoni:

Wettaq il-proċedura fuq is-silġ. Żid 1.0 mL ta' -solvent ta' proteina trasportatur aċiduż imkessaħ minn qabel f'kunjett ta' 1 mg.

Uża mikropipetta biex injetta l-kampjun bil-mod ħafna tul il-ħajt tal-flixkun, filwaqt li tevita l-ġenerazzjoni ta' bżieżaq tal-arja jew impatt dirett fuq il-kejk imnixxef bil-friża-.

Poġġi l-kunjett fuq is-silġ udawwar bil-mod orizzontalment għal 5-10 minutisakemm it-trab jinħall kompletament.M'għandekx vortex, tħawwadx, daqqa fuq, jew tħawwadx b'mod vjolenti.

Konċentrazzjoni finali: 1 mg/mL (madwar 40 μM) soluzzjoni aċiduża stokk.

Dispensing u gradjent ta' dilwizzjoni:

Immedjatament xerred f'dożi singoli ta' 2-10 μL billi tuża tubi ċentrifugi silanizzati b'assorbiment baxx fuq is-silġ.

Meta tiddilwixxi, l-ewwel ħallat is-soluzzjoni aċiduża tal-istokk mill-inqas 100 darba b'PBS jew mezz ta' kultura li jkun fih 0.1-1% BSA biex jinnewtralizza l-pH. Pereżempju, ħu 1 μL ta' soluzzjoni tal-ħażniet u żidha ma' 99 μL ta' PBS li jkun fih 1% BSA biex tikseb soluzzjoni intermedja ta' 10 ug/mL.

Is-soluzzjoni intermedja hija mbagħad dilwita għall-konċentrazzjoni finali tax-xogħol. Il-passi kollha tad-dilwizzjoni jitwettqu fuq is-silġ.

Tikkettjat b'mod ċar: GDF-8, konċentrazzjoni, pH, data tal-preparazzjoni, numru tal-lott, temperatura tal-ħażna.

Referenza tal-konċentrazzjoni tax-xogħol:

Esperimenti taċ-ċelluli in vitro: Il-firxa ta 'konċentrazzjoni użata komunement hija 0.1 sa 5 ug/mL (madwar 4 sa 200 nM), li jeħtieġ li tiġi ottimizzata skond it-tip ta' ċellula u l-iskop sperimentali.

Esperimenti in vivo fuq l-annimali: Id-dożaġġ għandu jiġi ddeterminat b'mod strett skond il-mudell u r-rotta ta 'amministrazzjoni (eż., intraperitoneali, intramuskolari, ġol-vini) ibbażat fuq il-letteratura. Il-medda użata komunement hija fil-medda ug/kg sa mg/kg, uiridu jsiru esperimenti preliminari.

Eżempju ta' kalkolu: Biex tipprepara soluzzjoni ta 'ħidma ta' 100 ng/mL, ħu 1 μL tas-soluzzjoni intermedja ta '10 ug/mL u żidha ma' 100 μL ta' medja tal-kultura.

Punti ewlenin li wieħed jinnota:

Temperatura baxxa u ġentilezza: Il-proċess kollu għandu jitwettaq fuq is-silġ, u l-movimenti għandhom ikunu estremament ġentilibiex tipprevjeni d-denaturazzjoni tal-proteini.

Dissoluzzjoni ta 'aċidu sfurzat: Għandu jiġi maħlul f'soluzzjoni buffer aċiduża (pH 4-5), li hija kruċjali għaż-żamma tas-solubilità u l-attività tagħha.

Proteini trasportaturi sfurzati: Id-dissoluzzjoni u d-dilwizzjoni għandhom isiru bl-użu ta’ soluzzjonijiet li fihom proteini trasportaturi bħal BSAbiex jipprevjenu l-assorbiment u l-aggregazzjoni.

Iċ-ċiklu tal-iffriżar-tidwib huwa strettament ipprojbit: Iċ-ċikli ripetuti ta' iffriżar-tidwib huma strettament ipprojbiti; is-soluzzjoni għandha titqassam f'daqqa waħda. Soluzzjoni tax-xogħol dilwitam'għandux jinħażen; għandu jiġi ppreparat u użat immedjatament.

Osservazzjoni tal-kundizzjoni: Wara r-rikostituzzjoni, is-soluzzjoni għandha tkun ċara u kemmxejn opalexxenti. Il-preżenza ta 'kwalunkwe materja flokulanti, partiċelli, jew turbidità tindika li l-proteina ġiet żnaturata u aggregata, u s-soluzzjoni għandha tintrema.

2. Kundizzjonijiet tal-ħażna:

Trab lajofilizzat mhux rikostitwit:

Ħażna biss: -80 grad (deep freeze). Taħżinx f'-20 grad.

Żmien kemm idum tajjeb: 12-il xahar fi -80 grad.

Ipproteġi strettament mid-dawl: Aħżen fil-borża oriġinali tal-fojl tal-aluminju tad-dawl-prova b'dessikant ġewwa.

Soluzzjoni rikostitwita:

Tqassim immedjat:Dispensingtrid titlesta fi żmien 5 minutiwara r-rikostituzzjoni.

Ippakkjat mill-ġdid u ffriżat: Jista 'jinħażen biss f'-80 grad, ħajja massima fuq l-ixkaffa ġimagħtejn, mhux rakkomandat għall-ħażna.

Il-ħażna hija strettament ipprojbita: Is-soluzzjoni tax-xogħol dilwita għandhama jinħażenxu għandhom jinżammu fuq is-silġ u jintużaw fi żmien 4 sigħat.

Kundizzjonijiet tat-trasport:

Għandu jiġi ttrasportattaħtsilġ niexef(-78 grad) kundizzjonijiet.

L-imballaġġ għandu jkollu biżżejjed silġ niexef u insulazzjoni biex jiġi żgurat li ma jinħallx matul il-proċess kollu.

3. Standards ta' Stabbiltà u Ipproċessar:

Stabbiltà fiżikokimika:

Huwa sensittiv għall-pH uhuwa stabbli u jinħall biss f'pH aċiduż (4.0-5.0). Jiġbor u jippreċipita faċilment f'pH newtrali u alkalin.

Huwa estremament sensittiv għall-istress termali u mekkaniku (vortiċi, oxxillazzjoni, tbaqbieq) u ċikli ripetuti ta' iffriżar-tidwib.

Huwa sensittiv għall-assorbiment tal-wiċċ, għalhekk għandhom jintużaw proteina trasportatur u kontenitur b'assorbiment baxx-.

Iż-żamma tal-bijoattività:

erba 'prinċipji: "xoljiment aċiduż, protezzjoni tat-trasportatur, ħelu ta'-temperatura baxxa, u projbizzjoni stretta ta' ċikli ta' ffriżar-tidwib".

Ħtieġaxejn, jekk jogħġbok ikkuntattjalilna

It-tags Popolari: gdf-8 1mg/kunjett jippromwovi b'mod sinifikanti l-massa tal-muskoli u t-titjib tas-saħħa, iċ-Ċina gdf-8 1mg/kunjett jippromwovi b'mod sinifikanti l-massa tal-muskoli u t-titjib tas-saħħa manifatturi, fornituri, fabbrika